各位科研打工人，你是不是也遇到过原代细胞转染不进去的问题？要么转染不进去，要么加大剂量后，转是转进去了，但细胞死了一大片。那么今天，我们就来聊聊实验室里最让人头痛的话题——原代细胞转染。

原代细胞，是指直接从生物体组织分离培养的细胞，它们保持着最接近体内状态的特性，是许多研究的"黄金标准"。但正是这种"原生态"的特性，让它们变得格外难伺候：

1.体质敏感：离开舒适的体内环境后，对外源核酸更为敏感，会启动更强的防御机制降解外源DNA/RNA。

2. 环境适应性差：对转染试剂和外来培养基等物质不够适应，需要特定的培养基和培养条件，通用型转染方案往往水土不服。

3. 增殖有限：增殖能力有限，转染窗口期转瞬即逝。

4. 耐受性差：对于一般细胞能够耐受的转染试剂毒性，原代细胞很可能耐受不了。

5. 实验重复性差：即便同批次分离的细胞，转染效率也可能天差地别，实验结果重复性成谜。

那么，该如何化解这些难题呢？针对原代细胞的以上特点，我们可以尝试如下解决方案：

一 试剂选择有讲究：

脂质体类试剂通常比阳离子聚合物更温和，更有利于原代细胞的存活和核酸的进入；或者优先选用专为原代细胞设计的转染试剂。

二 把控时机很关键：

在原代细胞对数生长期进行转染，此时细胞生长力旺盛，耐受力较强；细胞密度要恰到好处(通常70-80%)，太少，不利于细胞存活，太多，不利于转染成功；避免传代次数过多（传代次数过多会导致细胞状态变差增殖减弱，更不利于转染）。

三 优化方案不可少：

必须做剂量梯度预实验，每种原代细胞对于核酸和转染试剂的耐受度、接受度都不一样，不做预实验没法确定最优转染条件；质粒纯度要保证，高纯度质粒有利于高效转染，生产质粒时可以考虑使用启动子增强表达。

四 辅助手段来帮忙：

对于耐受性差的原代细胞，可在转染后立即更换为新鲜培养基，以延长恢复时间；对于特别娇贵的原代细胞，在转染前可考虑使用特殊培养因子等，保证细胞状态。

来自前线科研人的血泪建议

我们采访了多位"转染老手"，总结出这些肺腑之言：

 "不要迷信文献条件，一定要自己优化！"

 "记录每一批细胞的详细信息，找出规律。"

 "准备Plan B，有些细胞就是转不进去，换方法比死磕强！"

 "保持耐心，原代细胞转染本来就是一场持久战。"

当然，如果你希望更加高效、便捷地完成转染，那也是有其他方法的。Arcegen Celthy SureXcel 3000转染试剂——新一代高分子转染试剂，从转染每一步提高成功率！

高效转染：在293T、HeLa、MCF7、HepG2、A549等三十多个细胞系中验证，具有强大的转染效率；

广泛兼容：DNAmRNA/siRNA/miRNA/ASO全类型核酸通用；

毒性极低：新型高分子材料，毒性极低，最大限度提高细胞存活率。

对于原代细胞转染极其适配！

原代巨噬细胞BMDM质粒转染

使用Celthy SureXcel 3000和竞品T*3000同时在原代巨噬细胞BMDM中转染质粒DNA，结果显示，Celthy SureXcel 3000转染效率优于竞品T*3000。

原代猪肺泡巨噬细胞质粒转染

使用Celthy SureXcel 3000和竞品T*3000同时在原代猪肺泡巨噬细胞转染质粒DNA，结果显示，Celthy SureXcel 3000转染效率优于竞品T*3000。

原代真皮成纤维细胞质粒转染

使用Celthy SureXcel 3000和竞品B*8000同时在原代真皮成纤维细胞转染质粒DNA，结果显示，Celthy SureXcel 3000转染效率优于竞品B*8000。

除了原代细胞，Arcegen SureXcel 3000在mRNA、siRNA转染中也具有优秀的转染效果。

mRNA高效转染

使用Celthy SureXcel 3000和竞品T*3000同时在多种细胞中转染mRNA，结果显示，在不同细胞中，Celthy SureXcel 3000表现均优于竞品T*3000。

siRNA高效转染

使用Celthy SureXcel 3000和竞品T*3000同时在多种细胞中转染siRNA，结果显示，在不同细胞中，Celthy SureXcel 3000表现均优于竞品T*3000。

现在试用Celthy SureXcel 3000转染试剂，体验立即提升的细胞转染效率！

产品订购